Waarom 99% zuiver niet 99% peptide betekent

Zuiverheid en gehalte zijn twee verschillende metingen, en vrijwel elk certificaat dat je onder ogen krijgt meldt alleen de eerste. Ze beantwoorden een andere vraag, en ze door elkaar halen is de meestgemaakte fout van een koper.

Wat zuiverheid werkelijk meet

HPLC-zuiverheid is een relatief getal. Het apparaat scheidt alles in het monster, een detector kijkt bij ongeveer 220 nanometer naar de stroom, en de uitkomst is het aandeel van het gemeten signaal dat bij de hoofdpiek hoort. Negenennegentig procent zuiver betekent: van alles wat de detector zag, kwam negenennegentig procent als één piek van de kolom.

De woorden die het werk doen zijn van alles wat de detector zag. Een UV-detector op 220 nm ziet peptidebindingen. Hij ziet geen water. Hij ziet geen zout. En hij ziet het tegenion niet waar het peptide tijdens de synthese aan gekoppeld raakte.

Wat er in het flesje zit dat de detector nooit zag

Peptiden uit vastefasesynthese worden meestal afgesplitst en gezuiverd in trifluorazijnzuur, en komen daar als trifluoracetaatzout uit. Dat tegenion hoort bij het droge gewicht in jouw flesje. Net als het restvocht, dat gevriesdroogd poeder gemakkelijk opneemt en vasthoudt.

Geen van beide komt in een HPLC-zuiverheid terecht, want geen van beide absorbeert noemenswaardig bij die golflengte. Ze zijn simpelweg onzichtbaar voor de meting. Een poeder kan 99% zuiver zijn volgens HPLC en naar massa toch voor een flink deel uit tegenion en water bestaan.

Het getal dat de echte vraag beantwoordt

Het netto peptidegehalte is een aparte bepaling — meestal via stikstofanalyse of aminozuuranalyse — en zegt welk deel van de droge massa in het flesje werkelijk peptide is. Weeg je materiaal af en wil je weten hoeveel peptide je hebt, dan is dát het getal, en zuiverheid is er geen vervanging voor.

De meeste certificaten in deze markt vermelden het niet. Dat is goed om te weten voordat je twee flesjes op prijs per milligram vergelijkt, want de milligrammen op het etiket zijn brutogewicht.

Wat je hieruit meeneemt

• Zuiverheid zegt hoe schoon de peptidefractie is. Gehalte zegt hoeveel peptide er in het flesje zit. Ze zijn niet uitwisselbaar.
• Een ontbrekend gehaltecijfer is op zichzelf geen alarmsignaal — het wordt zelden gemeld — maar het betekent wel dat de milligrammen op het etiket bruto zijn.
• Prijs per milligram vergelijken tussen leveranciers vergelijkt brutogewichten, tenzij beiden het netto gehalte melden.
• Meldt een leverancier 99% zuiverheid en suggereert hij dat dat 99% peptide is, dan begrijpt hij zijn eigen certificaat niet of hoopt hij dat jij het niet doet.